@thesis{thesis,
		author={ },
		title ={ISOLASI DAN KARAKTERISASI LIPASE STABIL PELARUT ORGANIK DARI HERMETIA ILLUCENS FASE PUPA},
		year={0000},
		url={https://digilib.itb.ac.id/gdl/view/26899},
		abstract={Hermetia illucens merupakan salah satu jenis lalat yang mampu mendegradasi sampah organik. Siklus 

hidup H. illucens yang sebagian besar dihabiskan tanpa mengkosumsi air diharapkan menjadi indikasi 

dimilikinya enzim-enzim dalam tubuh H. illucens yang stabil dalam pelarut organik, salah satunya 

lipase. Lipase merupakan enzim yang secara alami dapat mengkatalisis hidrolisis/sintesis rantai 

panjang trigliserida. Lipase yang memiliki stabilitas dalam pelarut organik sangat dibutuhkan dalam 

dunia industri yang mulai banyak menggunakan lipase sebagai katalis sintesis organik. Pada 

penelitian ini dilakukan isolasi lipase dari H. Illucens pada fase pupa yang diharapkan memiliki 

stabilitas dalam pelarut organik. Fase pupa atau fase dorman dipilih sebagai sumber lipase karena 

memiliki aktivitas lipase yang lebih tinggi dibandingkan fase lainnya. Preparasi isolasi lipase 

dilakukan dengan terlebih dahulu menggerus H. illucens fase pupa yang kemudian dilarutkan dalam 

larutan NaCl, KCl , MgCl2, dan Sukrosa. Larutan ini dihomogenisasi dalam 300 μL bufer tris-HCl 

(pH 8) serta ditambahkan 1% Triton X-100. Larutan diinkubasi dalam es selama 10 menit kemudian 

di sentrifuga dengan kecepatan 8000 rpm selama 25 menit dalam suhu 4oC. Supernatan yang 

didapatkan dari hasil proses isolasi ini merupakan larutan yang mengandung lipase. Selanjutnya 

dilakukan optimasi pH, temperatur, waktu inkubasi, jenis substrat, dan jenis bufer. Fraksinasi lipase 

dilakukan dengan menggunakan garam ammonium sulfat dalam tiga tingkat, yaitu fraksi 0-20%, 20- 

40%, dan 40-60%. Aktivitas lipase diuji dengan mengukur absorbansi senyawa para nitrofenol (pNP) 

pada panjang gelombang 405 nm dengan menggunakan spektrofotometer UV/Vis. Karakterisasi 

lipase dilakukan terhadap pH, temperatur, waktu inkubasi, pelarut organik, ion logam, dan inhibitor. 

Ditentukan juga parameter kinetika reaksi enzim. Hasil penelitian menunjukkan lipase memiliki 

aktivitas tertinggi pada suhu 37 oC dan pH 8 dengan waktu inkubasi 20 menit. Lipase juga diamati 

memiliki aktivitas tertinggi dengan penggunaan substrat pNPP dan bufer tris-HCl. Isolasi dan 

fraksinasi lipase memberikan hasil terbaik pada fraksi 20-40% dengan nilai untuk masing-masing 

fraksi secara berturut-turut 0,95 U/mg, 1,90 U/mg, dan 0,52 U/mg. Penambahan ion K+ dan Mg2+ 

teramati meningkatkan aktivitas lipase dengan cukup signifikan. Aktivitas lipase juga teramati 

meningkat dengan inkubasi menggunakan pelarut organik metanol, 2-propanol, etanol, dan aseton. 

Lipase teramati memiliki model kinetika Michaelis-Menten dengan nilai Vmax = 0,0027 mM/menit dan 

KM = 3,4460 mM. Dapat disimpulkan pada penelitian ini berhasil diisolasi lipase dari H. illucens fasa 

pupa yang stabil dalam pelarut organik dan berhasil dilakukan karakterisasi terhadap enzim ini.}
		}