Identifikasi dan isolasi kolagenase dari Vibrio sp B-30 yang ditumbuhkan dengan media TSB-YE-Salt
Total View This Week96

Institusion

Universitas Gadjah Mada

Author

Subject

S2 Bioteknologi 

Datestamp

2019-07-16 00:00:00 

Abstract :
(ABSTRAKSI) Kolagenase adalah jenis enzim proteolitik yang spesifik menghidrolisis protein kolagen dan tidak dapat memecah protein jenis lain, sehingga kecil kemungkinan merusak jaringan. Alternatif aplikasi kolagenase pada bidang pangan terutama industri perikanan yaitu pada proses pengelupasan kulit cumi-cumi. Kulit epidermis cumi-cumi terdiri dart tropokolagen yang memungkinkan terhidrolisis dengan kolagenase. Pada proses tersebut bentuk kolagen cumi-cumi dalam keadaan natif, sedangkan tidak semua jenis kolagenase dapat mendegradasi kolagen dalam bentuk natif sehingga diperlukan kolagenase spesifik yang mampu mendegradasi kolagen dalam bentuk natif yaitu kolagenase dari Vibrio sp B-30. Penelitian ini bertujuan untuk isolasi dan identifikasi kolagenase dari Vibrio sp B-30 yang ditumbuhkan dengan media alternatif. Media alternatif yang dapat digunakan untuk pertumbuhan Vibrio sp B-30 dan pembentukan kolagenase adalah media TSB-YE-Salt (tryptic soy broth yeast extract salt). Optimasi media dilakukan pada media MB (marine broth) dan TSB-YE-Salt (tryptic soy broth yeast extract salt) dengan hasil media TSB-YE-Salt lebih baik dari MB dilihat dari protein total yang dihasilkan dan aktivitas enzimnya. Protein total enzim pada TSB-YE-Salt adalah 1,002 mg/ml sedangkan MB adalah 0,401 mg/m. Enzim yang dihasilkan pada media TSB-YE-Salt mempunyai kemampuan kolagenase dimana enzim ini tidak dapat memecah substrat kasein dan hanya mendegradasi substrat kolagen. Optimasi waktu pembentukan enzim terjadi pada fase log baik dengan media TSB-YE-Salt maupun MB. Enzim dari TSB-YE-Salt dapat dipisahkan dengan kromatografi kolom menggunakan matrik DEAE-cellulose. (ABSTRACT) Collagenase is a proteolytic enzyme which specifically hydrolyze collagen and do not hydrolyze other protein. The alternative application of collagenase is in processing of squid skin. Epidermis skin of squid consist of tropocollagen, which is hydrolyzed by collagenase. During the process, the shape of squid collagen was found in native folding, where collagenase type generally could not degrade such structure, therefore, a specific collagenase is needed, it is expected be obtained from Vibrio sp B-30. The purpose of this research is to isolate and identify collagenase from Vibrio sp B-30 which were grown on an alternative media. The alternative media (TSB-YE-Salt) was used in this studies. Vibrio sp B-30 were grown in MB media and TSB-YE-Salt media. The result showed that the Vibrio indicated better for total protein production and enzyme activity in TSB-YE-Salt media than MB media. Production enzyme from Vibrio sp B-30 using TSB-YE-Salt media was 1.2 mg/ml while using MB media was 0.41 mg/ ml. Enzyme that was produced in TSB-YE-Salt media had collagenase ability which is could not divide casein and degrade collagen substrate. The enzyme was maximally produced during log-phase both in TSB-YE-Salt and MB media. Collagenase from TSB-YE-Salt was purified using DEAE-cellulose column chromatography.